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13 岁儿童肥胖发生相关因子与青春期发育相关
来源: | 作者:prod78c67 | 发布时间: 2012-06-06 | 3879 次浏览 | 分享到:
四川大学华西公共卫生学院,成都 610041
摘要:目的 分析儿童肥胖形成中肥胖发生调节因子及与青春期发育相关激素的变化,探讨这些激素在
青春期儿童肥胖形成中的变化特点及其相互关系。方法 以78 例肥胖的13 岁儿童和84 例同岁正常对照
儿童为研究对象,以放射免疫法测定血中食欲素(orexins) 、瘦素(leptin) 、胰岛素(insulin) 及睾酮(T) 、雌二醇
(E2 ) 、黄体生成素(LH) 、卵泡刺激素(FSH) 等浓度,计算骨龄(BA) 。结果 肥胖儿童血中leptin、insulin 浓度显
著高于对照组浓度( P < 0101) ;肥胖儿童血中OrexinA 浓度显著低于对照组浓度( P < 0101) ;肥胖男生T 浓度
显著低于对照组,肥胖女生E2 、LH浓度显著高于对照组( P < 0101) ;男女肥胖儿童骨龄明显大于对照组,且
随着骨龄的增大血中leptin , LH 含量明显增加;男女肥胖与正常儿童LH 与FSH 之间、leptin 与insulin , C2肽,
E2 之间均存在正相关关系( P < 0101) ;对照组男生LH、FSH 与E2 存在正相关关系( r = 01373、01314 , P <
0105) ;leptin 与T存在负相关关系( r = - 01423) P < 0101 ,与FSH 存在正相关关系( r = 01308 , P < 0105) ;对照
组女生leptin、LH与E2 均存在正相关性( r = 01585、01647 , P < 0101) ;男女肥胖组LH、FSH与T,E2 之间均未发
现相关关系,肥胖男生leptin 与T呈负相关关系( r = - 01574 , P < 0101) 。结论 肥胖儿童相对与正常儿童血
中leptin , orexina ,insulin 和T, E2 , LH浓度发生了明显变化,肥胖儿童高浓度leptin 水平可使体内T, E2 , LH
浓度水平发生变化,影响肥胖儿童的青春期发育。
基金项目:河南省自然科学基金项目(No. 511041400)
作者简介:娄晓民,男,博士研究生,副教授,工作单位为郑州大学公共卫生学院
1 郑州大学公共卫生学院
关键词:食欲素 瘦素 胰岛素 睾酮 雌二醇 黄体生成素 肥胖
中图分类号:R179  Q575111       文献标识码:A
Study on the level changes of obesity2associated factors and puberty2
associated hormones and their relationship between obese and normal
13 years old children
Lou Xiao2min , Duan Guang2cai , Chen Jiang , Zhou Yan , et al .
West China School of Public Health , Sichuan University , Chengdu 610041 , China
Abstract :Objective  To investigate the level changes of obesity2associated factors and puberty2associated hormones
and their relationship between obese and normal Children. Methods  The concentrations of orexins , leptin , insulin ,
testosterone(T) , estradiol (E2 ) , luteotrophic hormone (LH) , as well as follicle stimulating hormone(FSH) in blood were
measured respectively in 78 cases of 13 years old obesity children and 84 normal children as a control group by the means
of RIA methods. The bone ages were evaluated with“bone age standard of hundred percent scale”. Results  The leptin
and insulin concentrations were significantly higher in obesity children as compared with the control group ( P < 0101) .
The concentrations of plasma orexinA were significantly lower in obesity children as compared with the control group ( P <
0101) . The concentrations of T were significantly lower in obesity boys as compared with the control group ( P < 0101) .
The concentrations of E2 and LH were significantly higher in obesity girls as compared with the control group ( P < 0101) .
The bone age of the obese children was significantly older than that of the control group. Along with the bone age of
children became older , the concentration of leptin and LH in blood were significantly increased. There was a positive
correlation between LH and FSH in two groups of either boys and girls and so did between leptin and insulin , C2peptide ,
E2 ( P < 0101) . In the group of normal boys , the positive correlations between LH , FSH and E2 were shown( r = 01373 ,
01314 , P < 0105) , and a negative correlations between leptin and T were shown as( r = - 01423 , P < 0101) ,a positive
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第35 卷 第4 期
2006 年 7 月
卫 生 研 究
JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH
   
Vol. 35  No. 4
Jul.  2006
© 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
correlation between leptin and FSH was also shown as ( r = 01308 , P < 0105) . In the control group of girls , there were
positive correlations between leptin , LH and E2 ( r = 01585 , 01647 , P < 0101) . Any correlations between LH , FSH T and
E2 were not shown in the two obese groups of boys and girls. Conclusion  The leptin , orexinA , insulin , T, E2 , and LH
concentrations had been changed significantly in blood among those obesity children , and so as their interactions. The high
level of leptin in obesity children may change the concentrations of T, E2 and LH and affect the development of puberty.
Key words :orexins ,leptin ,insulin , luteotrophic hormone , testosterone , estradiol , obesity
  人们很早就发现青春期的发动与一定量的体重或体脂贮
存有关[1 ,2 ] 。近年来的研究提出瘦素(leptin) 可诱导动物青春
期的开始,使性成熟时间提前[3 ,4 ] 。但处在青春期的肥胖与非
肥胖儿童体内与脂肪代谢和性发育有关的激素水平变化有何
特点,存在什么关系仍不清楚。本文以13 岁肥胖和正常儿童
为研究对象,对瘦素(leptin) ,食欲素(orexins) ,胰岛素(insulin)
及睾酮(testosterone ,T) , 雌二醇(estradiol , E2 ) , 卵泡刺激素
(follicle stimulating hormone , FSH) , 黄体生成素( luteotrophic
hormone , LH) 水平进行分析,探讨这些激素在儿童青春期肥
胖形成中的变化规律及相互关系。
1  对象与方法
111  对象
某市区4 所普通中学初一年级全部13 岁学生,测量身
高、坐高及体重,计算体质指数[ body mass index ,BMI = 体重
(kg)P身高2 (m2 ) ] ,以13 岁儿童BMI 肥胖筛查标准(男> 2517 ,
女> 2516) 为肥胖判断标准筛选肥胖儿童[5 ] ,剔除体格发育不
良和继发性肥胖者。以知情同意原则从肥胖者中选取研究对
象,按同年龄、同性别、同学校、身高相近原则1∶1 选择对照。
女生记录月经初潮年龄。
112  实验方法
11211  血样采集 取对象晨起空腹肘静脉血5ml 置于采血
管内,37 ℃水浴30 分钟,3000rPmin 离心10min ,分离血清于试
管内,编号、封口后置于- 76 ℃低温冰箱保存,用于瘦素、T、E2
等测定。另采血5ml 置于含EDTA 的采血管内,立即轻摇防
止血液凝固,然后将血样转移到含有抑蛋白酶肽(016TIUPml
血样) 的采血管内轻摇,在4 ℃以1600 g 离心20min 后收集血
浆于试管内,编号、封口后置于- 76 ℃低温冰箱内冷藏,用于
血浆中肽的提取。
11212  血浆中肽提取 试剂盒由Phoenix Pharmaceuticals , Inc.
生产。缓冲液A (产品编号RK2BA21) : 1 %三氟乙酸( TFA ,
HPLC级) 水溶液。缓冲液B (产品编号RK2BB21) :60 %乙腈
(HPLC 级) ,溶于1 %TFA; 柱(SEP2COLUMN) 中含200mg C18
(产品编号RK2SEPCOL21) 。
肽提取步骤: (1) 酸化处理:取1ml 血浆加入等体积的缓
冲液A ,混匀,4 ℃10000 g ,离心20min ; (2) 柱平衡:用1ml 缓冲
液B 洗一次后再用缓冲液A 洗3 次,每次3ml ; (3) 将酸化后的
血浆溶液加入到预处理过的C218SEP 柱中,取缓冲液A 缓慢
洗柱两次,每次3ml ,弃洗柱液,再取3ml 缓冲液B 缓慢洗脱,
用聚苯乙烯管收集洗脱液; (4) 在低温冷冻干燥器中挥发洗脱
液进行干燥,用于OrexinA , OrexinB 的测定。
11213  OrexinA , OrexinB 测定 测定RIA Kit 试剂盒由Phoenix
Pharmaceuticals , Inc. 生产, Catalog No. 分别为:RK2003230 ,RK2
003231。用250μl RIA 缓冲液溶解干燥物, 每测定管各加
100μl ,用于放射免疫测定。步骤如下:加入样品或标准肽及
抗体,涡旋混匀,4 ℃孵育16~24 小时;加入125 I2肽,涡旋混匀,
4 ℃孵育16~24 小时;加入羊抗兔lgG血清(GAR) 和正常兔血
清(NRS) ,涡旋混匀,室温孵育90 分钟;加入RIA 缓冲液,涡旋
混匀,1700 g 离心40 分钟,弃上清(TC 管除外) ,用r 计数仪测
各管的沉淀得CPM值,计算结果。
11214  瘦素测定 测定方法和试剂盒(125 I2LEP RIA Kit) 由中
国原子能科学研究院北京原子高科核技术应用股份有限公司
建立和提供(产品编号IMK2408) 。用重组人瘦素免疫动物获
得抗血清,制备125 I2LEP 及标准品,建立一步竞争法瘦素放免
分析法,定量测定人血清中瘦素浓度,各项操作均严格按说明
书的要求进行。
11215  其它激素的测定 T、E2 、LH、FSH、胰岛素及C2肽(C2
peptide ,C2p) 测定采用放射免疫法。试剂盒购于中国原子能
科学研究院北京原子高科核技术应用股份有限公司。测定方
法步骤严格按照操作说明书进行,整批测定。
113  骨龄判定
拍摄左手及腕部后前位X 线片。包括中指末端及尺桡
骨远端干骺部位,X 线球管中心线从第3 掌骨中部射入。以
李果珍骨龄百分计数法计算骨龄(Bone age , BA) [6 ] ,每张片分
别由2 名专业人员阅读,读数相差018 岁以内者取其平均值
记录,超过018 岁者重新阅读。
114  统计学处理
数据录入计算机,试验结果用SPSS1210 软件进行分析,
计量资料组间比较确定方差齐性,进行方差分析、t 检验、直
线相关回归分析等, P < 0105 为差异有统计学意义。
2  结果
共获有效样本162 例,肥胖组儿童为78 例,其中男54 例,
BMI 均值(29143 ±1184) ,女24 例,BMI 均值(28109 ±2130) ;对
照组儿童84 例,其中男58 例,BMI 均值(20142 ±1195) ,女26
例,BMI 均值(19153 ±1160) 。
211  肥胖与对照组儿童瘦素、食欲素、胰岛素、C2p 比较
肥胖与对照组儿童分别进行t 检验,结果除食欲素B 外
两组间差异皆有统计学意义( P < 0101) ,见表1。相同组内不
同性别间比较,对照组Leptin P < 0101 ,其它差异皆无统计学
意义P > 0105。
212  肥胖与对照组儿童T, E2 , FSH, LH, BA及MA比较
结果男生T、BA 两组间差异有统计学意义,女生E2 、LH、
MA、BA 两组间差异有统计学意义,见表2。相同组内不同性
别间比较,除对照组BA 外差异皆有统计学意义( P < 0101) 。
女生月经初潮发生率对照组65138 %(17P26) ,肥胖组87150 %
(21P24) ,经χ2 检验P > 0105。
第4 期娄晓民,等. 13 岁儿童肥胖发生相关因子与青春期发育相关激素分泌及其关系研究4 69
© 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
表1  肥胖组与对照组儿童血清瘦素、食欲素、胰岛素、C2肽比较
Table 1  Serum leptin ,prexins , insulin and C - p level in obese and control children( …x ±s)
性别组别n
食欲素A(1)
(pgPml)
食欲素B(1)
(pgPml)
瘦素
(ngPml)
胰岛素
(mIUPL)
C2肽
(μgPL)
男对照组58 4. 62 ±1. 54 8. 00 ±1. 10 6. 76 ± 4. 64 20. 31 ±14. 88 3. 27 ±1. 76
肥胖组54 3. 17 ±2. 10 (2) 8. 45 ±1. 81 27. 47 ±15. 48 (2) 35. 78 ±15. 51 (2) 5. 86 ±2. 94 (2)
女对照组26 4. 87 ±1. 59 8. 66 ±2. 00 10. 08 ± 5. 50 21. 79 ±12. 83 3. 20 ±1. 48
肥胖组24 2. 98 ±0. 37 (2) 8. 83 ±2. 09 32. 63 ±15. 61 (2) 34. 74 ±15. 32 (2) 5. 80 ±3. 46 (2)
  注: (1) 男肥胖组27 例,对照组30 例,女肥胖组15 例,对照组17 例, (2) t 检验与对照组比较P < 0101
表2  肥胖与对照组儿童睾酮、雌二醇、卵泡刺激素、黄体生成素、骨龄、初潮年龄比较
Table 2  Serum T, E2 , FSH, LH, MA, BA level in obese and control children( …x ±s)
性别组别n
睾酮
(μgPL)
雌二醇
(ngPL)
黄体生成素
( IUPL)
卵泡刺激素
( IUPL)
初潮年龄
(Year)
骨龄(1)
(Year)
男对照组58 398. 94 ±154. 32 9. 94 ± 4. 70 4. 98 ±2. 18 5. 70 ±2. 27 P 13. 46 ±0. 72
肥胖组54 320. 52 ±148. 05 (2) 10. 72 ± 3. 79 5. 19 ±1. 76 5. 31 ±2. 08 P 14. 09 ±0. 62
女对照组26 56. 76 ± 21. 71 28. 59 ±14. 08 7. 62 ±3. 33 7. 53 ±2. 88 12. 35 ±0. 49 13. 30 ±0. 50
肥胖组24 55. 75 ± 20. 39 45. 99 ±19. 08 (2) 15. 46 ±7. 45 (2) 8. 80 ±4. 74 11. 77 ±0. 97 (2) 13. 70 ±0. 40 (2)
  注: (1) 男对照组56 例,肥胖组52 例,女对照组24 例,肥胖组23 例;经t 检验,与对照组比较(2) P < 0101 (3) P < 0105
213  不同骨龄间各检测指标的比较
根据李果珍骨龄百分计数法计算出的骨龄范围为1211~
1519 岁。以骨龄不足13 岁( < 13) 、13 岁至不足14 岁( ≥13)
和14 岁及以上( ≥14) 对男女儿童进行重新分组,分性别对不
同骨龄组儿童血清食欲素A、食欲素B、瘦素、胰岛素、C2p 、E2 、
T、LH、FSH水平、BMI 和女生MA 进行方差分析,结果显示男
生瘦素、胰岛素、E2 和BMI ,女生瘦素LH 和BMI 差异有统计
学意义,见表3。
表3  不同骨龄儿童血清瘦素、胰岛素、雌二醇、黄体生成素、睾酮、体质指数比较
Table 3  Serum leptin , insulin , E2 , LH, T, BMI level of children in difference bone age( …x ±s)
性别骨龄n
瘦素
(ngPml)
胰岛素
(mIUPL)
雌二醇
(ngPL)
黄体生成素
( IUPL)
睾酮
(μgPL)
体质指数
(kgPm2)
男生< 13 岁18 10. 66 ±9. 90 17. 91 ±10. 73 7. 46 ±4. 03 4. 36 ±1. 50 376. 43 ±193. 32 22. 09 ±4. 11
≥13 岁45 13. 05 ±10. 73 28. 02 ±17. 78 10. 58 ±4. 13 5. 21 ±2. 21 357. 85 ±139. 47 23. 67 ±4. 46
≥14 岁45 23. 12 ±18. 94 (2) 32. 70 ±16. 79 (2) 11. 20 ±4. 30 (2) 5. 34 ±1. 81 356. 76 ±161. 70 27. 03 ±4. 77 (2)
女生< 13 岁10 12. 33 ±10. 48 23. 75 ±12. 96 27. 12 ±17. 35 7. 05 ±2. 55 51. 20 ±21. 64 21. 06 ±3. 88
≥13 岁25 22. 13 ±18. 16 27. 93 ±16. 75 36. 30 ±17. 94 12. 15 ±6. 95 61. 44 ±20. 50 23. 60 ±4. 48
≥14 岁12 25. 82 ±12. 84 (1) 30. 47 ±15. 85 42. 71 ±19. 62 12. 48 ±6. 13 (1) 52. 33 ±22. 03 26. 28 ±4. 71 (1)
  注:经方差分析(1) P < 0105 (2) P < 0101
214  相关关系分析
做促性腺激素和性腺激素间的相关分析,两组儿童无论
男女LH与FSH之间都存在相关关系( r = 01434、01458、01504、
01569 , P < 0101) ;对照组儿童LH 与E2 存在相关性(男r =
01373 ,女r = 01647 P < 0101) ,对照组男生FSH与E2 存在相关
性( r = 01314 P < 0105) ;肥胖组LH、FSH 与T、E2 之间未发现
相关关系。
胰岛素与C2p 相关分析,对照组相关系数男r = 01740 ,女
r = 01787 ;肥胖组男r = 01673 ,女r = 01751 , P < 0101。
分性别对两组儿童进行瘦素与食欲素A、食欲素B、胰岛
素、C2p 和T、E2 、FSH、LH之间的相关关系分析,结果见表4。
3  讨论
食欲素是1998 年新发现的一类神经多肽[7 ] ,包括食欲素
A ,食欲素B 两种,目前人们对食欲素的认识多来自动物实验
的研究结论,了解较多的是食欲素A , 主要与肥胖发生、摄食
行为调控密切相关,作用与瘦素相反[7 ,8 ] 。本文对13 岁42 例
肥胖和47 例正常儿童血浆中食欲素A ,食欲素B 的浓度进
表4  血中瘦素与其它激素的相关性分析表( 相关系数)
Table 4  Correlation coefficient between leptin and other hormones ( r)
激素
瘦素
男女
对照组肥胖组对照组肥胖组
胰岛素0. 361 (2) 0. 425 (2) 0. 438 (1) 0. 574 (2)
C2肽0. 341 (2) 0. 486 (2) 0. 510 (2) 0. 720 (2)
食欲素A - 0. 220 - 0. 071 0. 131 0. 143
食欲素B 0. 257 0. 361 - 0. 426 0. 424
睾酮- 0. 423 (2) - 0. 574 (2) 0. 101 - 0. 261
雌二醇0. 350 (2) 0. 371 (2) 0. 585 (2) 0. 580 (2)
黄体生成素0. 132 - 0. 059 0. 225 - 0. 012
卵泡刺激素0. 308 (1) - 0. 123 0. 011 - 0. 385
  注:与对照组比较(1) P < 0105 (2) P < 0101
行了测定,男女肥胖儿童血中食欲素A 水平明显低于对照组
( P < 0101) ,而食欲素B 两组间差异无统计学意义,与国外成
人妇女测定结果一致[9 ] 。瘦素主要由脂肪细胞分泌,其血清
含量与机体脂肪储量呈正相关,对肥胖和对照组儿童血清瘦
素水平进行比较,结果女生肥胖组瘦素浓度达到对照组的
3124 (32163P10108) 倍,肥胖男生为对照组的4106 (27147P6176)
4 70   卫  生  研  究第35卷
© 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
倍,肥胖儿童瘦素显著高于对照组( P < 0101) ,与食欲素A 相
反[9 ] 。
肥胖与对照组儿童体内性发育相关激素水平比较结果显
示:肥胖男生T明显低于对照组,而肥胖女生的E2 、LH 明显
高于对照组( P < 0105) 。且无论男女肥胖儿童的骨发育都较
正常对照组儿童明显提前,肥胖女生的月经初潮年龄亦较正
常对照组提前0158 (12135~11177) 岁。显示肥胖儿童体内与
性发育相关的激素分泌水平相对正常儿童发生了变化,男生
雄性激素水平下降,女生雌性激素水平上升[3 ,13 ] 。
两组儿童瘦素与T、E2 、LH、FSH 的相关分析显示:男生瘦
素与T水平呈负相关,与E2 呈正相关,正常对照组男生瘦素
与FSH存在正相关关系,肥胖组不存在;女生瘦素与E2 呈正
相关( P < 0101) ,与睾酮无相关关系。促性腺激素和性激素间
相关分析显示,两组儿童无论男女LH 与FSH 之间都存在正
相关关系,对照组男女儿童LH 与E2 存在正相关关系P <
0101 ,男生FSH与E2 也存在相关关系( P < 0105) 。但肥胖组
LH、FSH与E2 之间未见相关性。
研究显示给大鼠注射外源性瘦素可伴有外周LH 水平上
升[11 ] ,性腺功能低下的个体用T 替代治疗后血清瘦素水平亦
下降[12 ] ,说明瘦素与LH、T 具有相互作用关系。结合本文结
果分析可认为:肥胖可使儿童体内瘦素显著升高,瘦素的增高
可影响肥胖儿童体内E2 、LH及T 分泌的变化,使肥胖儿童青
春期发育特点发生变化,如骨龄提前、女生月经初潮年龄提
前等。
骨龄是反应个体发育水平和成熟程度比较精确的指标,
以骨龄< 13 岁、≥13 岁、≥14 岁对男女儿童分组进行的方差
分析显示:男生瘦素,胰岛素、E2 和BMI 差异有统计学意义,
女生瘦素、LH和BMI 差异有统计学意义( P < 0105) 。女生瘦
素, E2 虽然差异未检出统计学意义,但明显可看出其含量水
平有随骨龄增大而增加的趋势,且骨龄越大女生月经初潮年
龄越小。青春期的启动是由下丘脑促性腺激素的释放增加所
致[6 ] , 而瘦素也可诱导动物青春期的开始[3 ,4 ] 。本文儿童发
育年龄不同伴随着体内瘦素和LH 含量的明显不同,且含量
随骨龄的增大而增加,同样显示了体内瘦素和LH 等含量的
变化与儿童青春期发育有关。
青春期儿童瘦素水平女性一般高于男性[3 ] ,本文在进行
性别间比较时发现, 对照组女生瘦素明显高于男生( P <
0101) ,但肥胖组儿童性别间差异却未检出统计学意义。肥胖
儿童体内瘦素浓度在不同性别间差异的减少很难用机体脂肪
储量来解释,基于雄性激素能抑制脂肪细胞中瘦素的分泌和
瘦素mRNA 的产生[12 ,13 ] ,分析可能与肥胖男性儿童体内雄激
素水平降低对瘦素的抑制作用下降有关。
胰岛素是一种重要的生长调节激素,除调节糖代谢外,也
参与脂肪和蛋白质代谢。C2p 无生物活性,由胰岛β细胞与胰
岛素呈等分子分泌,血清胰岛素浓度水平的影响因素较多,而
血C2p 浓度相对较稳定[7 ] ,本文同时测量了胰岛素和C2p 浓
度。结果显示肥胖儿童体内胰岛素, C2p 均显著高于对照组
儿童( P < 0101) 。相关分析显示无论正常或肥胖儿童瘦素与
胰岛素和C2p 都存在正相关关系,肥胖儿童瘦素与C2p 的相
关系数明显大于与胰岛素的相关系数,提示瘦素对胰岛素分
泌有促进作用,瘦素可通过刺激胰岛β细胞上的瘦素受体而
影响胰岛素的分泌量[10 ] 。
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(2005212212 收稿)
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